Turėtų būti įrengta kiekviena mikrobiologijos laboratorija

Siekiama ištirti Mikrobiologijos laboratorijoje naudojamo įrangos darbo principą ir veikimą. Šiuolaikinė mikrobiologijos laboratorija turėtų būti aprūpinta šiais įrenginiais.

1. Karšto oro orkaitė sterilizavimui:

Jis naudojamas stiklo dirbinių, tokių kaip bandomieji vamzdeliai, pipetės ir Petri lėkštelės, sterilizavimui. Toks sausas sterilizavimas atliekamas tik stiklo dirbiniams. Skystos medžiagos, pvz., Paruoštos terpės ir fiziologiniai tirpalai, negali būti sterilizuojami orkaitėje, nes dėl garavimo jie praranda vandenį.

Stikliniai indai sterilizuojami 180 ° C temperatūroje 3 valandas. Orkaitė (3.2 pav.) Turi termostato valdiklį, pagal kurį reikalinga pastovi temperatūra gali būti gaunama bandymų ir klaidų būdu. Termostato reguliatoriaus rodmuo yra apytikslis, o tikslią temperatūrą skaitykite į krosnį arba įmontuotą L formos termometrą.

Modernioje orkaitėje (3.3 pav.) Yra skaitmeninis temperatūros indikatorius ir automatinis temperatūros reguliatorius, norint lengvai nustatyti norimą temperatūrą. Laikas nustatomas skaitmeniniu laikmačiu. Įdėjus stiklo indus, durys uždarytos ir orkaitė įjungta.

Nustatyta reikiama temperatūra. Kai orkaitė pasiekia nustatytą temperatūrą, laikmatyje nustatomas reikalingas sterilizavimo laikas. Orkaitė automatiškai išsijungia po nustatyto laiko. Orkaitė atidaroma tik tada, kai temperatūra nukrenta arti kambario temperatūros. Priešingu atveju, jei durys atidarytos, o orkaitės vidus vis dar yra labai karštas, šaltas oras gali skubėti ir įtrūkti.

2. Džiovinimo orkaitė:

Tam tikriems reagentams paruošti reikia, kad stikliniai indai, tinkamai išvalius ir nuplaunant distiliuotu vandeniu, būtų išdžiovinti. Jos džiovinamos džiovinimo spintoje 100 ° C temperatūroje, kol stiklo indai visiškai išdžiūsta.

3. Autoklavas:

Autoklavas yra mikrobiologijos laboratorijos branduolys. Jis naudojamas ne tik sterilizuoti skystas medžiagas, tokias kaip paruoštos terpės ir fiziologinio tirpalo (skiediklių) tirpalai, bet ir, kai reikia, sterilizuoti stiklo indus.

Jis turi tą patį darbo principą kaip ir buitinis slėginis viryklė. Maksimali temperatūra, kurią galima gauti verdant vandenį atvirame inde, yra 100 ° C (vandens virimo temperatūra).

Ši temperatūra yra pakankama, kad būtų galima nužudyti tik ne sporų formuotojus, tačiau sunku nužudyti sporas formuojančias bakterijas tokioje temperatūroje, nes jos išsiskiria formuodamos karščiui atsparias sporas. Šiai temperatūrai sporų nužudymas užtrunka labai ilgai.

Kita vertus, kai vanduo virinamas uždarame inde, dėl padidėjusio slėgio viduje, virimo temperatūra pakyla ir garų temperatūra gali būti gerokai didesnė nei 100 ° C. Ši aukšta temperatūra reikalinga, kad nužudytų visas bakterijas, įskaitant karščiui atsparias sporas. Garų temperatūra didėja didinant garų slėgį (3.1 lentelė).

3.1 lentelė. Temperatūra, pasiekiama esant skirtingiems garų slėgiams:

Naudojant standartinę vertikalią autoklave (3.4 pav.) Į jį įpilama pakankamai vandens. Jei vanduo yra per mažas, šildymo metu autoklavo dugnas išdžiūsta ir tolesnis kaitinimas ją sugadina.

Jei jis turi įmontuotą vandens šildymo elementą, (3.5 pav.) Vandens lygis turi būti išlaikytas virš elemento. Kita vertus, jei yra per daug vandens, norint pasiekti reikiamą temperatūrą, reikia daug laiko.

Sterilizuojamos medžiagos yra padengtos amatų popieriumi ir išdėstytos ant autoklavo apačioje laikomo aliuminio arba medinio rėmo, kitaip, jei medžiagos išlieka pusiau panardintos arba plūduriuojančios, jos virsta virimo metu ir gali patekti į vandenį. Autoklavas puikiai sandariai uždaromas, tik atidarius garų išleidimo vožtuvą.

Tada jis šildomas per liepsną arba įmontuotą šildymo elementą. Autoklave esančiam orui turi būti leidžiama visiškai išeiti per šį vožtuvą. Kai vandens vožtuvas patenka iš vožtuvo, jis uždaromas.

Temperatūra ir slėgis viduje didėja. Slėgio reguliatoriaus slėgio padidėjimas pastebimas. Paprastai sterilizavimas atliekamas 121 ° C temperatūroje (15 svarų vienam kvadratiniam coliui, ty 15 psi) 15 minučių. Reikiamas laikas skaičiuojamas nuo taško, kai pasiekiamas reikalingas temperatūros slėgis.

Kai pasiekiamas reikalingas temperatūros slėgis, jis palaikomas reguliuojant šildymo šaltinį. Po nurodyto laiko (15 minučių), šildymas nutraukiamas ir garų išleidimo vožtuvas šiek tiek atidarytas. Jei staiga sumažėja slėgis, nedelsiant atidaromi skysčiai iš konteinerių.

Palaipsniui atidaromas garų išleidimas vis daugiau ir taip, kad visi garai galėtų ištrūkti. Autoklavas atidaromas tik tada, kai slėgis nukrenta atgal į normalų atmosferos slėgį (0 psi). Autoklave niekada negalima atidaryti, kai viduje vis dar yra slėgis. Karštos sterilizuotos medžiagos pašalinamos laikant jas švariu audiniu arba asbesto dengtomis rankinėmis pirštinėmis.

Jei naudojamas garų apvalkalas su horizontalia autoklave, katilas sukuria garą (3.6 pav.). Jis išleidžiamas į nustatytą slėgį į išorinę kamerą (striukę). Oro leidžiama pabėgti ir tada jos garų išleidimo vožtuvas uždarytas.

Karštas švarkas šildo vidinę kamerą, taip šildydamas sterilizuojamas medžiagas. Taip išvengiama garų kondensacijos ant medžiagų. Dabar garas po slėgiu išleidžiamas iš apvalkalo į vidinę kamerą, o oras leidžiamas iš jo.

Tada jo garų išleidimo vožtuvas uždarytas. Vidaus slėgio slėgis garuose viršija 100 ° C temperatūrą, kuri gali sterilizuoti viduje esančias medžiagas. Autoklave taip pat yra automatinė uždarymo sistema, ty jei temperatūra ir slėgis nepasiekia kambario sąlygų, durų negalima atidaryti.

Be slėgio ratuko, jis taip pat turi atskirą temperatūros reguliatorių, rodantį temperatūrą vidinėje kameroje. Be to, autoklavas automatiškai palaiko temperatūrą ir slėgį ir išsijungia po nustatyto sterilizavimo laiko.

4. Mikrobiologinis inkubatorius:

Laboratorijoje gaunamas gausus mikrobų augimas, auginant juos tinkamoje temperatūroje. Tai daroma inokuliuojant pageidaujamą mikrobą į tinkamą auginimo terpę ir po to inkubuojant jį esant optimaliam temperatūros augimui.

Inkubacija atliekama inkubatoriuje (3.7 pav.), Kuri išlaiko pastovią temperatūrą, konkrečiai tinkamą konkrečios mikrobos augimui. Kadangi dauguma mikroorganizmų, patogeniškų žmogui, auga normaliai žmogaus kūno temperatūrai (ty 37 ° C), įprastinė inkubacijos temperatūra yra 37 ° C.

Inkubatoriuje yra termostatas, palaikantis pastovią temperatūrą, nustatytą pagal reikalavimą. Temperatūros rodmenys termostate yra apytiksliai. Tikslią temperatūrą galima pamatyti ant inkubatoriaus pritvirtinto termometro. Tiksli temperatūra, kaip reikalaujama, nustatoma pasukant termostato rankenėlę pagal bandymą ir klaidą ir matuojant termometro temperatūrą.

Dauguma šiuolaikinių inkubatorių (3.8 pav.) Yra programuojami, kuriems nereikia bandymų ir klaidų temperatūros nustatymo. Čia operatorius nustato pageidaujamą temperatūrą ir reikiamą laiką.

Inkubatorius automatiškai jį palaiko. Drėgmė tiekiama į inkubatorių įdedant vandens stiklinę augimo laikotarpiu. Drėgna aplinka stabdo terpės dehidrataciją ir taip išvengia klaidingų eksperimentinių rezultatų.

5. BOD inkubatorius (žemos temperatūros inkubatorius):

Tam tikriems tikslams kai kurie mikrobai turi būti auginami žemesnėje temperatūroje. Tokiais atvejais inkubacijai naudojamas žemos temperatūros inkubatorius BOD (3.9 pav.), Kuris gali palaikyti temperatūrą nuo 50 ° C iki 2-3 ° C.

Pastovi norima temperatūra nustatoma pasukant termostato rankenėlę. Termostato rankenėlės sukimas sukelia adatą ant ratuko, kuriame yra apytikslė temperatūra. Gauta tiksli temperatūra, sukant rankenėlę smulkiai bandymu ir klaidomis, ir nurodant temperatūrą ant inkubatoriaus pritvirtinto termometro.

Dauguma šiuolaikinių BOD inkubatorių (3.10 pav.) Yra programuojami, kuriems nereikia bandymų ir klaidų temperatūros nustatymo. Čia operatorius nustato pageidaujamą temperatūrą ir reikiamą laiką. Inkubatorius automatiškai jį palaiko.

6. Šaldytuvas (šaldytuvas):

Jis tarnauja kaip termiškai atsparių cheminių medžiagų, tirpalų, antibiotikų, serumų ir biocheminių reagentų saugykla vėsesnėje temperatūroje ir net esant žemesnei nei 0 ° C temperatūrai. Bakterijų atsargų kultūros taip pat saugomos tarp subkultūravimo laikotarpių. Jis taip pat naudojamas sterilizuotoms terpėms laikyti, kad būtų išvengta jų dehidratacijos.

7. Giluminis šaldytuvas:

Jis naudojamas cheminėms medžiagoms laikyti ir mėginiams saugoti esant labai žemai žemai temperatūrai.

8. Elektroninis viršų rinkinys:

Jis naudojamas dideliems kiekiams ir kitoms cheminėms medžiagoms sverti, kai tiksli svėrimas nėra labai svarbus.

9. Elektroninis analizės balansas:

Jis naudojamas tiksliai ir greitai pasverti nedidelius cheminių medžiagų kiekius ir mėginius.

10. Dvigubos analizės balansas:

Jis naudojamas cheminėms medžiagoms ir mėginiams tiksliai pasverti. Svėrimas užtrunka daugiau laiko, kai jis naudojamas tik avarijos atveju.

11. Distiliuoto vandens gamykla:

Vanduo naudojamas terpėms ir reagentams ruošti. Jei terpė ruošiama naudojant vandentiekio vandenį, joje esančios cheminės priemaišos gali trukdyti mikroorganizmų augimui terpėje. Be to, tuo didesnis bakterijų kiekis žiniasklaidoje, tuo ilgesnis yra laikas, reikalingas jų sterilizavimui, o didesnis yra kai kurių bakterijų išgyvenimo tikimybė.

Distiliuotame vandenyje, nors ir be bakterijų, yra mažiau bakterijų. Štai kodėl; tai yra geriausia, kai ruošiama mikrobiologinė terpė. Jis taip pat naudojamas ruošiant reagentus, nes cheminės priemaišos, esančios vandentiekio vandenyje, gali trukdyti tinkamai reaguoti į reagentų chemines medžiagas.

Kadangi Liebig kondensatoriaus distiliuoto vandens gamyba yra laiko nustatymo procesas, daugumoje laboratorijų jis gaminamas „distiliuotu vandeniu“. Paprastai distiliuoto vandens gamykla yra pagaminta iš plieno arba žalvario. Jis dar vadinamas distiliuotu vandeniu.

Ji turi vieną įleidimo angą, kuri turi būti prijungta prie vandens čiaupo ir du išėjimai, vienas distiliuotam vandeniui patekti į konteinerį, o kitas - iš karšto aušinimo vandens į kriauklę. Dar yra įdiegta ant sienos. Jį šildo įmontuoti elektriniai šildymo elementai (panardinamasis šildytuvas).

Vis dar veikia efektyviai, kai vandens srautas yra sureguliuotas taip, kad iš vis dar į kriauklę tekančio aušinimo vandens temperatūra nėra nei per didelė, nei per maža, ty šiltas vanduo turėtų tekėti. Distiliuotame vandenyje gali būti metalų, išmatuotų iš plieno arba žalvario talpyklos, pėdsakų.

Norint gauti be metalo distiliuoto vandens, naudojamas stiklo distiliavimo aparatas ir dar geriau yra kvarco distiliavimo aparatas. Tačiau mikrobiologijos laboratorijoje pakanka plieno arba stiklo distiliavimo aparato. Tiksliniams tyrimams naudojamas dvigubas arba trigubas distiliuotas vanduo.

12. Ultrapure vandens valymo sistema:

Tikslus analitinis darbas, dabar-a-dienos, vietoj dvigubo ar trigubo distiliuoto vandens, naudojamas mikrofiltruotas vanduo. Distiliuoto vandens atveju yra tikimybė, kad mažai lakiųjų medžiagų, esančių vandenyje, susikaupia vandens kaitinimo metu, o vėliau kondensuojasi į surinktą distiliuotą vandenį.

Taigi distiliuotame vandenyje gali būti tokių medžiagų pėdsakų. Norint įveikti šią problemą, naudojamas ultraprandinis vanduo. Čia leidžiamas vanduo per labai smulkias mikroskopines poras, kurios išlaiko mikroskopinę suspenduotą dalelę, įskaitant mikrobus.

Tada vanduo praeina per dvi jonų mainų dervų kolonas. Anijonų mainų derva adsorbuoja vandenyje esančias antraštes, o antraščių mainų derva adsorbuoja anijonus. Išeinantis vanduo yra labai grynas.

13. Homogenizatorius:

Mikrobiologinei analizei tiesiogiai naudojami skysti mėginiai, o kieti mėginiai kruopščiai sumaišomi su skiedikliais (paprastai fiziologiniu tirpalu), kad būtų gauta homogeninė bakterijų suspensija. Manoma, kad ši suspensija turi bakterijų homogeniškai.

Kietųjų mėginių ir skiediklių maišymas atliekamas homogenizatoriumi, kuriame variklis sukasi darbaratį su aštriais menteliais dideliu greičiu uždaroje homogenizatoriaus puodelyje, kuriame yra mėginys ir skiedikliai. Jis turi greičio reguliatorių, kad būtų galima valdyti rotoriaus sukimosi greitį.

Kai kuriose laboratorijose maišymas atliekamas rankiniu būdu sterilizuotu grūstuvu ir skiediniu. Šiuolaikinėse laboratorijose naudojamas vienkartinis maišelis, kurio viduje kietas mėginys ir skystieji skiedikliai yra aseptiškai įterpiami ir mechaniniu būdu sumaišomi peristaltiniu mašinos maišikliu. Ši mašina vadinama stomacher.

14. pH matuoklis:

PH matuoklis yra skystų terpių, skystųjų mėginių ir buferių pH nustatymo priemonė. Jame yra stiklo pH elektrodas. Jei jis nenaudojamas, jis turi būti laikomas pusiau panardintas į vandenį, esantį mažoje stiklinėje, ir, pageidautina, jį uždengti varpine, kad būtų išvengta dulkių susikaupimo vandenyje ir vandens praradimo išgarinant.

Prieš naudojimą skaitiklis kalibruojamas naudojant du žinomus pH standartus atitinkančius buferius. Paprastai buferiai yra pH 4, 0, 7, 0 ir 9, 2. Prietaisas įjungtas ir įšyla 30 minučių. Temperatūros kalibravimo rankenėlė pasukama į tirpalų, kurių pH yra matuojamas, temperatūrą.

Tada elektrodas supilamas į buferį (pH 7, 0). Jei rodmuo nėra 7, 00, pH kalibravimo rankenėlė sukasi, kol rodmuo bus 7, 00. Tada elektrodas panardinamas į kitą buferį (pH 4, 0 arba 9, 2).

Jei rodmuo yra toks pat, kaip naudojamo buferio pH, prietaisas veikia tinkamai. Priešingu atveju elektrodas įjungiamas panardinant į 0, 1 N HC1 24 valandas. Atlikus kalibravimą, mėginių pH nustatomas įterpiant elektrodą į juos ir pažymint skaitymą.

Kiekvieną kartą prieš įmerkiant į bet kokį tirpalą elektrodas turi būti nuplaunamas distiliuotu vandeniu. Mėginiuose neturėtų būti jokių suspenduotų lipnių medžiagų, kurios gali sudaryti dangą ant elektrodo galo ir sumažinti jo jautrumą.

Senojo modelio pH matuokliai turi dvigubus elektrodus (vienas iš jų veikia kaip etaloninis elektrodas), o nauji modeliai turi vieną kombinuotą elektrodą. Be to, norint įveikti temperatūros korekcijos problemą, dabar yra pH metrų su automatiniu temperatūros koregavimu.

Čia taip pat įterpiamas kitas „temperatūros elektrodas“ kartu su pH elektrodu, kuris matuoja tirpalo temperatūrą ir automatiškai ištaiso temperatūros svyravimų įtaką.

Sudėtingi pH matuokliai turi vieną gelio elektrodą. Tokie elektrodai turi labai mažą lūžio tikimybę, nes jie beveik visiškai uždaromi kietame plastikiniame korpuse, išskyrus antgalio. Antgalis turi ir pH, ir temperatūros jutiklius.

Be to, juos lengva prižiūrėti, nes jiems nereikia pastovaus panardinimo distiliuotame vandenyje, nes elektrodo antgalis uždarytas plastikiniu dangteliu, kuriame yra prisotintas kalio chlorido tirpalas, kai jis nenaudojamas. Tačiau, ruošiant mikrobiologinę terpę, pH nustatomas siauros srities pH popieriais ir nustatomas pagal reikiamą pH, prireikus pridedant rūgščių arba šarmų.

15. Karštoji plokštelė:

Karštoji plokštė naudojama chemikalų ir reagentų šildymui. Karštoji plokštė yra pagaminta iš geležies plokštės, kuri iš apačios šildoma elektriniu šildymo elementu. Reikiamą šildymo laipsnį gauna reguliatorius.

16. Vandens vonia:

Kartais reikalingas šildymas labai tiksliomis temperatūromis. Tokios tikslios temperatūros negalima gauti inkubatoriuje ar orkaitėje, kurioje temperatūra šiek tiek svyruoja. Tačiau tikslią temperatūrą galima palaikyti vandens vonioje, kuri užtikrina stabilią temperatūrą.

Vandens vonia susideda iš talpyklos su vandeniu, kuris šildomas elektriniais šildymo elementais. Reikalinga vandens temperatūra gaunama didinant arba mažinant šildymo greitį pasukant termostatą bandymu ir klaidomis.

Drebulio vandens vonioje medžiaga yra kaitinama reikiamoje temperatūroje ir tuo pačiu metu nuolat pakratoma. Drebulį atlieka variklis, kuris sukasi ir perkelia konteinerius į kiekvieną sukimosi kryptį. Kratymo greitį vėl kontroliuoja reguliatorius. Drebulys sukelia medžiagą ir padidina proceso greitį.

Dauguma šiuolaikinių vandens vonių yra programuojami ir nereikalauja bandymų ir klaidų. Norimą vandens temperatūrą galima palaikyti norimu laikotarpiu, atitinkamai programuodami. Jis naudojamas bakterijų auginimui sultinio terpėje tam tikroje temperatūroje.

17. Kvebeko kolonijos skaitiklis:

Apskaičiuojant mėginių bakterijas, daroma prielaida, kad vienintelė bakterija sukuria vieną matomą koloniją, auginamą ant kietintos maistinės terpės plokštės. Taigi, skaičiuojant kolonijų skaičių, galima įvertinti bakterijų skaičių mėginyje.

Kartais kolonijos yra labai mažos ir per daug perkrautos, todėl sunku suskaičiuoti. Skaičiavimas tampa paprastas, kai naudojamas mechaninis rankinis skaitiklis, vadinamas Kvebeko kolonijos skaitiklis (3.11 pav.). Plokštelė padalijama į keletą kvadratinių padalinių, o kolonijos padidinamos 1, 5 karto didinamuoju stiklu, todėl skaičiavimas yra paprastas.

18. Elektroninės kolonijos skaitiklis:

Elektroninis kolonijų skaitiklis yra dviejų tipų:

(1) Rankiniai elektroniniai kolonijų skaitikliai ir

(2) Stalinis elektroninis kolonijų skaitiklis.

Rankinis elektroninis kolonijų skaitiklis yra rašiklinio stiliaus kolonijų skaitiklis su rašaliniu veltiniu. Skaičiuojant Petri lėkštelėje auginamų bakterijų kolonijas, ji laikoma apversta, kad kolonijos būtų matomos per petri lėkštelės apačią.

Kolonijos yra pažymėtos liečiant petri lėkštelės stiklo paviršių su kolonijos skaitiklio veltiniu. Taigi kiekviena kolonija yra pažymėta tašku, kurį sukėlė veltinio galiuko rašalas ant petri lėkštelės apatinio paviršiaus. Vienu judesiu elektroninės kolonijos žymės, skaičiuoja ir patvirtina pyptelėjimą.

Kumuliacinis kolonijų skaičius rodomas keturių skaitmenų LED ekrane. Stalinių elektroninių kolonijų skaitiklių atveju, petri lėkštelė, kurioje yra bakterijų kolonijų, dedama į apšviestą stadiją, o skaičiavimo juosta yra nuspausta. Tikslus kolonijų skaičius iš karto rodomas skaitmeniniame skaityme.

19. Magnetinis maišytuvas:

Ruošiant tirpalus, tam tikroms cheminėms medžiagoms reikia ilgai maišyti ir ištirpinti tam tikruose tirpikliuose. Magnetinis maišytuvas naudojamas tokioms medžiagoms lengvai ir greitai ištirpinti. Į talpyklą, kurioje yra tirpiklio ir tirpiklio, įdedamas nedidelis teflono padengtas magnetas, vadinamas „maišymo juosta“.

Tada konteineris dedamas ant magnetinio maišytuvo platformos, žemiau kurios variklis sukasi dideliu greičiu. Pritvirtintas besisukančiu magnetu, teflono padengtas magnetas sukasi konteinerio viduje ir sukelia turinį. Dabar tirpalas greitai ištirpsta.

Tefloninė danga neleidžia magnetui reaguoti su tirpalu, kuris liečiasi su juo. Visiškai ištirpinus, teflono padengtas magnetas iš tirpalo pašalinamas vidutinio ilgio retriveriu, vadinamu „maišymo baro retriveriu“.

20. Sonicator:

Jis naudojamas ląstelių plyšimui naudojant aukšto dažnio bangas.

21. Vortex maišytuvas:

Tai prietaisas, naudojamas kruopščiai maišyti skysčius mėgintuvėliuose. Jis turi rotorių, kurio greitį galima valdyti. Rotoriaus gale yra putų gumos viršus. Kai mėgintuvėlio dugnas nuspaustas ant šios putų gumos, rotorius pradeda suktis, tokiu būdu dideliu greičiu pasukdamas mėgintuvėlio dugną.

Dėl centripetinės jėgos tirpalas gerai sumaišomas. Ypač naudinga serijinio praskiedimo metu skaičiuojant bakterijas, kurioms reikia homogeninės bakterijų ląstelių suspensijos.

21. Laminarinio srauto kamera:

Tai kamera (3.12 pav.), Naudojama sterilizuotų medžiagų aseptiniam perdavimui, taip pat mikrobų inokuliavimui. Dulkių dalelės, plaukiančios oro uosto mikrobuose. Šios mikroprocesorinės dulkių dalelės gali patekti į sterilizuotą terpę ir užteršti jas, kai jos atidaromos mikroorganizmų inokuliacijos metu arba perkeliamos iš vieno indo į kitą.

Norėdami tai pašalinti, kai inokuliacija atliekama atvirame ore, mažo inokuliavimo ploto oras sterilizuojamas bunseno degiklio liepsna. Šildomas oras tampa šviesus ir juda aukštyn, taip užkertant kelią dulkių dalelėms patekti į terpę per trumpą atidarymo procesą.

Siekiant dar labiau sumažinti mikroorganizmų pakrauto oro užteršimo galimybę, naudojama laminarinė srauto kamera. Tai yra stiklui pritaikyta kubo formos kamera. Oro ventiliatorius pučia orą iš aplinkinių ir perduoda jį per HEPA filtrą („High Efficiency Particulate Air filter“), kad jis taptų be dulkių (be mikrobų).

Šis oras be mikrobų per kamerą patenka laminariniu būdu ir išeina iš kameros per atviras duris. Šis sluoksninis mikrobiologinio oro srautas iš kameros į išorę per atviras duris neleidžia išoriniam orui patekti į kamerą.

Taigi, kamera nepatenka į lauko ore esančius mikrobus, nors durys laikomos atidarytos inokuliuojant arba pernešant terpę. Kameros viduje įmontuotas UV lempas sterilizuoja kamerą prieš naudojimą.

Jame yra nerūdijančio plieno platforma su dujotiekio jungtimi bunseno degikliui. Prieš naudojimą, platforma išvaloma ir dezinfekuojama lizoliu, prijungtas bunseno degiklis ir uždaromos stiklo durys.

UV šviesa įjungiama 10 minučių, kad sterilizuotų aplinką kameros viduje ir tada išjungtų. Stiklinės durys niekada neturėtų būti atidarytos, kai įjungta UV šviesa, nes UV šviesa turi žalingą poveikį odai ir regėjimui. Ventiliatorius yra įjungtas, o tada atidaromos stiklo durys.

Dabar bunseno degiklis yra apšviestas, o terpės perkėlimas ar inokuliacija atliekama kameroje aseptiškai. Jei reikia tvarkyti labai pavojingus mikrobus, naudojama laminarinė srauto kamera su pirštinėmis, kurios išsikiša į kamerą iš priekinių stiklinių durų, nes turi būti uždarytos inokuliacijos.

22. Elektroninis ląstelių skaitiklis:

Jis naudojamas tiesiogiai skaičiuoti bakterijų skaičių tam tikrame skystame mėginyje. Elektroninių ląstelių skaitiklių pavyzdys yra „Coulter counter“. Šioje įrangoje leidžiama bakterijų ląstelių suspensija praeiti per minutę angą, per kurią teka elektros srovė.

Atsparumas angoje registruojamas elektroniniu būdu. Kai ląstelė eina per angą, kuri nėra laidininkė, ji trumpam padidina atsparumą. Kelių kartų pasipriešinimo momentų skaičius įrašomas elektroniniu būdu, o tai rodo, kiek bakterijų yra skystame mėginyje.

23. Membranų filtravimo aparatas:

Kai kurios medžiagos, pvz., Karbamidas, skaidosi ir praranda savo pradines savybes, jei jos sterilizuojamos šiluma. Tokios medžiagos sterilizuojamos membraninio filtravimo aparatu. Šiame aparate sterilizuojamos medžiagos tirpalas filtruojamas per membraninį filtrą, kuris neleidžia bakterijų ląstelėms nuslysti. Filtravimas atliekamas siurbimo slėgiu, kad padidėtų filtravimo greitis (2.19 pav., 30 psl.).

24. Mikroskopai:

Skirtingi mikroskopų tipai naudojami bakterijų morfologijos, judrumo, dažymo ir fluorescencinių reakcijų vizualiam stebėjimui.

25. Kompiuteriai:

Kompiuteriai paprastai naudojami rezultatų analizei. Jie taip pat naudojami lengvai identifikuoti bakterijas per kelias valandas. Priešingu atveju bakterijų identifikavimas yra varginantis procesas, kurio metu kartu nustatomos vienos bakterijos rūšys.

Kompiuteriai, naudojami bakterijų identifikavimui, yra „Apple II“, „IBM PC“ ir „TRS-80“ bei jų modernūs variantai. Kiekvienas laboratorijos personalas turėtų būti aprūpintas kompiuteriu ir interneto įranga.

26. Spektrofotometras:

Tai priemonė, skirta matuoti skirtingų spalvų intensyvumo sprendimus. Per tiriamąjį tirpalą patenka tam tikro bangos ilgio šviesos spindulys, o sugeriamos (arba perduodamos) šviesos kiekis matuojamas elektroniniu būdu.

Paprastas matomas spektrofotometras gali apšviesti šviesą bangos ilgiais matomame diapazone, o UV spinduliu matomas spektrofotometras gali perduoti šviesą su bangos ilgiais ultravioletiniame ir matomame diapazone. Mikrobiologijos laboratorijoje jis naudojamas tiesioginiam suspensijos bakterijų skaičiavimui ir kitiems tikslams.

27. Elektros įrenginiai:

Elektros įtampos svyravimas laboratorijoje yra viena iš svarbiausių priežasčių, dėl kurių sumažėja įrangos ilgaamžiškumas ir kartais jie sugadinami. Todėl visos įtampos jautrios įrangos turi būti aprūpintos įtampos apsaugos įtaisais, pvz., Stabilizatoriais, servo stabilizatoriais arba pastovios įtampos transformatoriais (CVT) pagal įrenginių gamintojų rekomendacijas.

Kompiuteriai, balansai ir keletas sudėtingų įrenginių turi būti prijungti per nepertraukiamą maitinimą (UPS), nes bet koks elektros energijos tiekimo sutrikimas jų veikimo metu gali labai pakenkti kai kuriems jų jautriems komponentams.

Laboratorija turėtų turėti didelės talpos generatorių, kad elektros energijos tiekimas visai laboratorijai būtų nutrauktas elektros energijos tiekimo sutrikimo atveju. Taip yra todėl, kad elektros energijos tiekimo sutrikimas ne tik stabdo laboratorijos veiklą, bet ir sukelia nepageidaujamus negrįžtamus pokyčius giluminiuose šaldytuvuose ir šaldytuvuose laikomuose mėginiuose.

28. Automatinė bakterijų identifikavimo sistema:

Tai priemonė, naudojama automatiniam bakterijų identifikavimui kompiuteriu (3.13 ir 3.14 paveikslai). Tradicinis bakterijų identifikavimo metodas yra labai ilgas ir sudėtingas.

Jis daugiausia susijęs su dažymu, judrumo testu, kultūrinėmis savybėmis, biocheminių bandymų serija ir galiausiai bakterijų pavadinimu „Bergey's determinacinės bakteriologijos vadove“, suderinant rezultatus su instrukcijoje pateiktais rezultatais. Automatinė bakterijų identifikavimo sistema automatiškai identifikuoja bakterijas per labai trumpą laiką.

Sistema, kaip ir VITEK 2 (3.14 pav.), Naudoja vienkartines korteles. Vienai bakterijai identifikuoti reikia vienos kortelės. Sistema gali turėti daugybę kortelių, kurios gali būti išdėstytos kasetėje, todėl vienu metu galima identifikuoti kelias bakterijas.

Kiekvienoje kortelėje yra keletas šulinių eilučių. Paprastai yra 8 eilutės po 8 šulinius (8X8 = 64 šulinėlių). Šuliniuose yra skirtingų dehidratuotų terpių, reikalingų įvairiems biocheminiams bandymams. Kapiliarinis vamzdelis yra pritvirtintas prie kiekvienos kortelės, kuri siurbia atpažįstamų bakterijų suspensiją ir išleidžia į visas šulines.

Dehidratuota terpė šulinėliuose hidratuojama suspensijos skysčiu, todėl bakterijos gali augti. Po nustatyto inkubavimo laikotarpio spalvų pokyčiai visuose šuliniuose automatiškai įrašomi sistemoje.

Spalvų pakeitimų rezultatai patenka į kompiuterį, prijungtą prie sistemos. Kompiuteris automatiškai lygina rezultatus su bibliotekoje esančiais skirtingų bakterijų rezultatais ir pagaliau suteikia tam tikros tikimybės bakterijų pavadinimą.

Norint identifikuoti, imamos bakterijos, auginamos kaip izoliuotos kolonijos ant plokštelės arba grynos kultūros, išaugintos šlaitu. Bakterijų lapinis tirpalas aseptiškai perkeliamas į sterilų fiziologinį tirpalą mėgintuvėlyje ir gaminama bakterijų suspensija.

Suspensijoje turi būti nustatytas nustatytas bakterijų tankis, nustatytas densitometru. Bandymo vamzdelis yra pritvirtintas prie kasetės ir prie jos pritvirtinta kortelė, todėl kortelės siurbimo kapiliarinio vamzdžio galas išlieka giliai panardintas į suspensiją.

Kiekviena kasete yra pritvirtinta keletas tokių mėgintuvėlių ir kortelių, priklausomai nuo identifikuotinų bakterijų skaičiaus. Kasetė įdedama į sistemos vakuuminę kamerą. Kameros viduje sukuriamas aukštas vakuumas, kuris verčia bakterijų suspensiją įsiurbti į kapiliarinius mėgintuvėlius ir išleisti į kortelių šulinius.

Kasetė išimama ir patalpinama į inkubavimo ir analizės kamerą. Čia kapiliariniai vamzdžiai supjaustomi ir supjaustyti galai uždaromi automatiškai. Tada inkubavimo procesas nustatytu laiku prasideda nustatytu laiku, kurį užprogramuoja valdymo skydelis. Inkubacijos metu kas 15 minučių kiekviena kortelė automatiškai pereina į spalvų skaitytuvą, kuris nuskaito spalvų pokyčius šuliniuose ir juos užrašo.

Įrašyti rezultatai patenka į kompiuterį, kuris automatiškai palygina juos su skirtingoms bakterijoms skirtomis bibliotekoje. Galiausiai, ji suteikia bakterijų, turinčių aiškias tikimybes, pavadinimus. Naudojamos kortelės patenka į sistemos atliekų šalinimo kamerą, kuri bus pašalinta ir galutinai pašalinta po sterilizavimo.

Žinomos automatinės bakterijų identifikavimo sistemos yra VITEK 2 ir API. Nors VITEK 2 veikia pagal pirmiau minėtą principą, API (analitinio profilio indeksavimo) sistema (3.13 pav.) Naudoja šiek tiek kitokį metodą automatiniam bakterijų identifikavimui, kuris apima rankinį inokuliavimą ir išorinį inkubavimą.

29. PCR termocikatorius, šaldomas centrifugas, itin centrifugas, dujų chromatografija (GC), didelio našumo skysčių chromatografija (HPLC), plonasluoksnė chromatografija (TLC), popieriaus chromatografija, kolonėlės chromatografija ir elektroforezės blokas:

Tai yra instrumentai, naudojami biocheminių medžiagų, tokių kaip bakterinė DNR, plazmidės, mikrobų toksinai, išskyrimui, valymui ir identifikavimui. Polimerazės grandininė reakcija (PCR) yra svarbi priemonė nukleino rūgščių pagrindu. Jis yra modernių mikrobiologijos ir biotechnologijų laboratorijų darbas.