Fluorescencinio mikroskopo darbo principas (su paveikslu)

Perskaitykite šį straipsnį, kad sužinotumėte apie fluorescencijos mikroskopo darbą!

Darbo principas:

Daugelis medžiagų sugeria šviesą. Tačiau kai kurie iš jų, sugeria tam tikro bangos ilgio ir energijos šviesą, skleidžia ilgesnio bangos ilgio ir mažesnės energijos šviesą.

Tokios medžiagos vadinamos fluorescencinėmis medžiagomis.

Šio reiškinio taikymas yra fluorescencijos mikroskopo pagrindas. Praktikoje mikrobai yra dažomi fluorescenciniu dažikliu ir apšviesti mėlyna šviesa. Dažai sugeria mėlyną šviesą (trumpesnį bangos ilgį) ir skleidžia žalią šviesą (ilgesnį bangos ilgį).

Fluorescenciniame mikroskope kaip šviesos šaltinis naudojama didelio intensyvumo gyvsidabrio lanko lemputė (4.11 pav.). Jis skleidžia baltą šviesą, kuri patenka į „žadintuvo filtrą“. Jis leidžia tik mėlyną baltos šviesos komponentą (balta šviesa susideda iš septynių spalvų, kurios mažėjančioje bangos ilgio eilėje yra violetinės, indigos, mėlynos, žalios, geltonos, oranžinės ir raudonos), kad būtų galima pereiti per jį ir blokuoti visus kitus spalvų komponentai.

Mėlynosios šviesos keliu naudojamas dichrinis veidrodis, atspindintis mėlyną šviesą, tačiau leidžia žalią šviesą. Veidrodis yra pritvirtintas taip, kad mėlyna šviesa atsispindėtų žemyn.

Mėginys anksčiau yra nudažytas fluorescenciniu dažikliu, tokiu kaip akridino oranžinis NO, akridino geltonas, akriflavinas, tioflavinas S, tioflavinas T arba titano geltonas G. Tam tikros bandinio dalys išlaiko dažus, o kitos - ne. Dalys, kurios išlaiko fluorescencinį dažą, sugeria mėlyną šviesą ir skleidžia žalia šviesą. Skleidžiama žalia šviesa eina aukštyn ir eina per dichroinį veidrodį. Ji atspindi mėlynąją šviesą, jei tokia yra, ir leidžia peržengti tik žalia šviesa.

Tada šviesa pasiekia „barjerinį filtrą“. Jis leidžia žalią šviesą patekti į akis ir užkirsti kelią bet kokiam likusiam mėlynos spalvos šviesai, kuri gali būti visiškai neatspindėta dichroinio veidrodžio.

Tokiu būdu, akis mato mėginio dažytas dalis kaip švytinčią žalią objektą prieš juodą foną, tuo tarpu neužfiksuotos mėginio dalys lieka nematomos.