Fluorescencinės-antikūninės technikos specifinių bakterijų aptikimui mėginyje

Perskaitykite šį straipsnį, kad sužinotumėte apie pagrindinį fluorescencijos-antikūno metodą tam tikros bakterijos aptikimui mėginyje!

Tikslas išmokti imunofluorescencijos arba fluorescencijos-antikūnų metodo principą, nustatant konkrečias bakterijas mėginyje.

Fluorescencinė-antikūninė arba imunofluorescencinė technika yra greita ir patikima tam tikrų bakterijų aptikimo mėginyje procedūra. Yra keletas antikūnų, pažymėtų fluorescenciniais dažais, tokiais kaip fluoresceino izocianatas arba izotiocianatas, kiekvienas būdingas konkrečioms bakterijoms.

Vienas iš šių paženklintų antikūnų, būdingų konkrečioms bakterijoms, kurios yra aptinkamos, į lašą įpilama į nešiojamą nežinomo bakterijų mėginio tepinėlį ir švelniai pasiskirsto ant tepalo paviršiaus. Petri lėkštelėje įdedamas sudrėkintas filtravimo popierius.

Tada stiklelis įdedamas į U formos stiklinį strypą ir 35 min. Inkubuojamas 25 ° C temperatūroje. Perviršinis antikūnas ant tepinuko nuplaunamas 1% fosfatiniu buferiniu tirpalu. Skaidulė yra panardinama į Coplin stiklainį, kuriame yra 1% fosfatiniu buferiniu tirpalu 25 ° C temperatūroje 10 minučių. Skaidrią džiovina bibulinis popierius. Į tepinėlį pridedamas vienas lašas glicerino. Jis padengtas dangteliu ir tiriamas fluorescenciniu mikroskopu.

Jei nežinomame bakterijų mėginyje yra specifinių naudojamų žymėtų antikūnų bakterijų, susidaro antigeno-antikūno kompleksas (čia bakterijos yra antigenas). Kadangi antikūnas yra pažymėtas fluorescuojančia medžiaga, antigenų-antikūnų kompleksas išskiria fluorescenciją, kai jis stebimas fluorescencijos mikroskopu. Jei nėra antikūnui būdingų bakterijų, fluorescencinis antikūnas nuplaunamas ir fluorescencija nepastebima.